蛋白中的色氨酸和酪氨酸可以被280nm的紫外光激發并釋放出熒光,其熒光性質與所處的微環境密切相關。蛋白變性過程中,色氨酸從疏水的蛋白內部逐漸暴露到溶劑中,熒光釋放的峰值也從330nm逐漸轉移到350nm。
內源差示掃描熒光技術(intrinsic fluorescence DSF),通過檢測溫度變化/變性劑濃度變化過程中蛋白內源紫外熒光(350nm/330 nm比值)的改變,獲得蛋白的熱穩定性(Tm值)、化學穩定性(Cm值)等參數。相比傳統的方法,無需添加染料,通量高,樣品用量少,數據精度高。
2022
06-19
2023
08-07